產(chǎn)品名稱：小鼠 TNF-a ELISA試劑盒（酶聯(lián)免疫檢測(cè)法）

商品品牌：酶聯(lián)生物

英文名稱：TNF-a  ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

主要成分：酶標(biāo)板、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本

例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本

操作步驟：

1）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照說明書在小試管中進(jìn)行稀釋。

2）加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔，在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍），加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4）配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6）加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7）溫育：操作同3。

8）洗滌：操作同5。

9）顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10）終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。

11）測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值），測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意步驟：

1）在使用前，將所有試劑放置30分鐘，平衡至室溫。

2）用試劑預(yù)先潤(rùn)洗槍頭在使用，取各種樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑必需更換槍頭。

3）移取標(biāo)準(zhǔn)品和樣品到微孔底部。

4）從微孔的邊緣加入試劑，以避免污染。

5）本試劑盒使用可拆分的微孔酶標(biāo)條，使用者可根據(jù)樣品量多少進(jìn)行拆分，未使用的酶標(biāo)條保持干燥，密封于試劑盒提供的鋁封袋中，于4℃保存，微孔酶標(biāo)條需安裝在相應(yīng)的框架上使用。

6）在加入顯色底物前，確保微孔內(nèi)沒有殘留的洗滌液，微量殘留的洗滌液可能導(dǎo)致分析結(jié)果的變化。

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