中文名稱：大鼠HIF-1a ELISA試劑盒（酶聯免疫檢測法）

產品規格：48T/96

產品存儲：低溫、避光保存

產品庫存：現貨供應

產品分類：酶聯免疫試劑盒

產品用途：僅供檢測，不得用于臨床

發貨方式：專門快遞免費送貨上門

實驗步驟：

使用前將各種試劑取出放置30分鐘，平衡至室溫，所有標準品和樣品必需設置平行對照實驗，快速加入試劑至樣品中，立即漩渦震蕩2秒混勻。

1. 依據實驗鍵盤紙決定酶標條的使用量，將剩余的酶標條連同干燥劑一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各個微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特異結合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP標準品）。

4. 移取100μL cAMP標準品至相應的孔。

5. 移取100μL樣品至相應的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特異結合）孔。

7. 移取50μL 偶聯酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗體工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特異結合）孔。

9. 將酶標孔置于孔板振動器上，250~500rpm，室溫孵育2小時。

10. 在吸水紙上拍干微孔內溶液，加洗滌液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗滌，清空各微孔，在干凈的無塵吸水紙上輕巧酶標板數次，以確保沒有洗滌液殘留。

12. 加5μL 偶聯酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL顯色底物溶液，于室溫靜置5~30分鐘。（顯色底物A和B需在臨用前15分鐘內等體積混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL終止液，終止后立即讀數。

15. 清除酶標儀Blank（空白）孔值，讀取450nm處的光密度值，在570nm至590nm之間好有修正，如果酶標儀不能自動清除Blank(空白)孔值，那么手動扣除每個讀數的Blank（空白）孔光密度值。

注意事項：

1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。

2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，測量時先用此孔調OD值至零。

3. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存，標準品、生物-素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用，請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物-素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

大鼠HIF-1a ELISA試劑盒（酶聯免疫檢測法）由上海酶聯生物現貨供應，包括HIF-1a ELISA試劑盒、酶聯免疫檢測試劑盒說明書、實驗原理、操作步驟等產品詳細介紹。